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推荐会议：2025（第七届） 世界细胞治疗与再生医学大会暨展览会
发票类型：增值税专用发票
参会凭证：
CRISPR/Cas9 是细菌和古细菌在长期选择压力中形成的一种适应性免疫防御，可用来有效抵御病毒及外源DNA的入侵。CRISPR的Type II已经被广泛用于基因工程，它包含Cas9，crRNA和tracrRNA，其中crRNA含有能够识别20bp的靶向互补序列。Cas9，crRNA和tracrRNA组成复合体，识别并结合crRNA互补的序列，然后解开DNA双链，Cas9中的HNH活性位点剪切crRNA的互补DNA链，RuvC活性位点剪切非互补链，最终导致DNA的双链断裂（DSB），进而实现基因的敲除和插入。
目前，CRISPR/Cas9系统已经广泛用于对哺乳动物细胞，细菌，斑马鱼，小鼠，猪，猴的基因编辑。本学习班将详细讲解CRISPR/Cas9基因编辑工具原理，操作流程，理论结合实践，将让大家详细了解到具体如何利用CRISPR/Cas9技术构建基因修饰动物等。学习班将为相关科研工作人员和兴趣爱好者提供了很好的培训资源。
南京巴傲得生物科技有限公司(Biogottechnology,co,Ltd），是专一服务于生命科学研究的专业技术型企业。是一大批志同道合的资深专业人士共同创办的具有现代化经营管理水平的生物高科技企业，从事生物技术产品的开发及销售，致力于将巴傲得生物打造成中国乃至世界一流的生物技术产品供应商。巴傲得生物长期备有Bioworld抗体现货4000多种抗体可以在一周左右送到客户的手里。精湛品质、合理价格、专业服务，是我们为您服务的宗旨。在细胞信号通路、免疫学、蛋白组学上拥有显著优势，其抗体产品、生长因子等为生命科学科研工作者提供了极大的便利。
第一天周五上午 9：00-12：00
1. 基因编辑技术原理
2. 基因编辑技术应用
3. 三种基因编辑技术（ZFN、TALEN和CRISPR/Cas9）介绍
4. 其他类型的CRISPR核酸酶介绍（Cpf1, SaCas9,人工改造后的Cas9）
5. CRISPR/Cas9常用载体介绍
6. 基因序列分析（请自带可无线上网之笔记本电脑或手机，在线设计演练）
7. 设计gRNA的网站（在线设计演练）
8. 构建gRNA表达载体（设计演练）
9. PCR引物设计（设计演练）
第一天周五下午 13：00-18：00
10. 基因敲除的方法（设计演练）
11. 基因敲入的方法（设计演练）
12. 检测脱靶的方法
13. 提高CRISPR/Cas9特异性的方法
14. CRISPR/Cas9导入细胞的方法
第二天 周六 上午 9:00-12:00
内容
1, px330质粒系统介绍。
2，sgRNA oligos模板退火方案。
3，退火gRNA与线性化CRISPR/Cas9载体连接详细方案。
4，连接产物转化到大肠杆菌（DH5α）。
5，转化产物涂板培养。
6，鉴定插入oligo后的基因编辑质粒ps330质粒体系。
7，构建同时敲除两个基因的质粒体系。
8，如何构建CRISPR/Cpf1质粒体系。
9，CRISPR/Cpf1质粒体系鉴定。
第二天周六下午 13:00-18:00
1，Cas9的多功能系统（如Cut, Nick, Activate, dCas9-FokI）的详细介绍。
2，利用CRISPR/Cas9构建基因修饰小鼠方法介绍和实际操作方案
3，CRISPR/Cas9相关基因修饰小鼠模型介绍和操作方案
4，利用CRISPR/Cas9构建基因修饰大动物（猪、猴）方法介绍和实际操作方案
5，CRISPR/Cas9与基因修饰大动物模型介绍和详细操作方案
专题：利用CRISPR/Cas9技术编辑动物细胞系
1， CRISPR/Cas9质粒细胞转染方法
2， 阳性细胞克隆筛选
3， 基因编辑细胞系的建立
4， 基因修饰情况分析方法
第三天 周日 上午9:00-12:00
1， CRISPR/Cas9重组子细菌克隆挑取，扩大化培养，鉴定，
2， 基因修饰基因组DNA模板（转染CRISPR/Cas9到动物细胞后提取DNA）制备
3， 目的靶基因的基因组DNA片段的PCR扩增，电泳检测PCR产物
4， PCR产物退火变性，T7E1酶切，电泳鉴定基因修饰情况
专题：利用CRISPR/Cas9技术构建基因敲除或敲入小鼠
1，基因编辑工具CRISPR/Cas9基本背景介绍
2，sgRNA设计及其功能验证
3，小鼠受精卵分离和培养
4，CRISPR/Cas9系统显微注射到小鼠受精卵
5，受精卵显微注射后回输到代孕母鼠体内
6，PCR和T7E1分析和鉴定基因敲除小鼠（Founder）
7，基因敲除小鼠基因敲除情况分析
8，CRISPR/Cas9构建基因敲除小鼠详细实验流程归纳和总结
第三天 周日 下午13:00-15:00
专题：实验结果的点评与讨论
1， CRISPR/Cas9载体构建讨论
2， 目的靶基因的基因组DNA片段的PCR扩增，电泳检测PCR产物结果讨论
3， PCR产物T7E1酶切，电泳鉴定基因修饰情况结果讨论
4， Sanger测序鉴定基因编辑结果
1） CRISPR/Cas9质粒阳性转化子测序结果确认
2） Sanger测序阅读基因编辑情况
3） 如何从测序色谱图中阅读靶向突变等位基因型
专题：利用CRISPR/Cas9技术构建基因修饰大型动物（猪）
1， 利用CRISPR/Cas9构建基因修饰大型动物（猪）流程
2， 基因修饰大型动物优势
3， 利用CRISPR/Cas9构建基因修饰大动物（猪）模型介绍
专题：CRISPR/Cas9脱靶问题分析
1， 脱靶产生的原因
2， 脱靶检测方法
3， 降低脱靶问题的方法
专题：基因编辑工具拓展
1， CRISPR/Cas9技术的发展与应用
2， 新基因编辑工具Cpf1，C2C2的用法与比较
3， 基因编辑工具的伦理问题
4， 基因编辑工具的应用拓展。
5， 根据学员的研究内容，详细答疑如何使用基因编辑工具。
第七期上海CRISPR/Cas9基因编辑学习班时间，地点
第一天主讲人：王永明教授
研究员，博士生导师，2015年国家青年千人获得者。1997-2001年就读兰州大学生命科学学院并获得学士学位，2001-2004年就读东北师范大学生命科学学院并获得硕士学位，2005-2010年在德国马克斯-德尔布吕克分子医学中心（MDC）做博士生研究，并获得柏林自由大学博士学位。2010-2013年在斯坦福大学医学院从事博士后研究。2013年至今历任复旦大学生命科学学院青年研究员、研究员。
第二天与第三天主讲人：李博士
德国慕尼黑工业大学海归博士，具有多年丰富的基因编辑实操经验。
注册费：3300元每位（注册费包含电子版教材、午餐，欢迎晚宴费用，住宿费自理。）
优惠政策：
1. 4月8号之前确认报名及转账3200元/人
2. 三人组团报名，3100元/人
3. 四人组团报名，3000元/人
4. 五人组团报名缴费，额外带一人免费注册！
可以开正规会务发票，纸质邀请函（盖红章）。
注意点：每人需要带笔记本电脑！
浦东新区中兴和泰酒店
交通指南：
浦东张江地区驾车距离2.7公里（约8分钟）、
上海浦东国际机场驾车距离26.2公里（约44分钟）、
上海虹桥国际机场驾车距离30.5公里（约73分钟）
上海中兴和泰酒店位于浦东张江高科技园区的核心地带，附近有地铁二号线张江高科站，毗邻新国际博览中心、磁悬浮车站，距离迪士尼度假区20分钟车程左右；周边生活设施齐全，有集餐饮、KTV、电影院等休闲娱乐为一体的综合性休闲广场。
酒店占地面积一万多平方米，属园林景观式酒店，拥有精心装修的各式客房，环境优雅、舒适，特设园林景观房、湖景套房。同时酒店全面覆盖WIFI，让你随时随地享受网上冲浪的乐趣。
店内有中、西餐厅、商务中心、大堂吧、10个中小型会议室、健身房、乒乓球室和SPA馆，装修温馨舒适、服务贴心细致，让你流连忘返。
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