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CRISPR/Cas9基因靶向修饰技术培训班2019(12月北京班)

CRISPR/Cas9基因靶向修饰技术培训班2019(12月北京班)

2019-12-21 09:00 至 2019-12-22 17:00

北京   北京理工大学国际教育交流中心

北京微旋基因技术有限公司   

50人

报名截止

推荐会议:2024(第七届) 世界细胞治疗与再生医学大会暨展览会

发票类型:增值税普通发票

参会凭证:现场凭电话姓名参会

部分参会单位:

天津农学院

-会议内容-

CRISPR是继RNA干扰技术、高通量测序技术等之后生物科学发展历史上最具颠覆性技术之一,使用高效、迅速且简单,在生物医学研究领域引起一场巨变,并因此成为生物医学实验室常规技术。随着CRISPR基因治疗临床实验的初步成功,以及2018年的基因编辑婴儿事件预热,CRISPR技术被越来越多的研究人员用来改造人类基因以消除疾病,创造生命力更加顽强的植物,消灭病原体等。在过去的7年中CRISPR技术斩获了生命科学领域各种重量级奖项,包括生命科学突破奖,盖尔德纳国际奖等,《Science》年度突破、《Nature》年度人物均授予了CRISPR单碱基基因编辑技术的突破,2019年9月,北京大学邓宏魁组完成世界首例基因编辑治疗艾滋病和白血病,使CRISPR技术再一次成为生命科学的焦点。

随着近几年的发展,研究者开发出越来越多基于CRISPR的新型基因编辑技术,例如CRISPR转录激活/抑制技术,基因定位,表观遗传修饰,单碱基基因编辑系统(BE2,BE3,ABE等),CRISPR基因突变检测系统(Sherlock、DETECTR),无修复模板基因敲入技术等。CRISPR/Cas9系统的应用更加便捷、高效,也更广泛,目前该技术成功应用于人类细胞、斑马鱼、小鼠以及细菌等基因组精确修饰,成为科研人员的强大工具,基于CRISPR临床实验已经取得初步成功。

为了让更多的科研人员及时全面的掌握CRISPR最新技术,并应用的相应的领域研究中。特于2019年12月21日至22日在北京理工大学国际教育交流中心举办CRISPR/Cas9基因靶向修饰技术培训班。在带教教师的指导下,学员独立完成一系列全部实验,免费获得一份CRISPR/Cas9敲除质粒载体(可以用于哺乳动物、植物、真菌、细菌、斑马鱼、线虫等,共60种)。免费赠送sgRNA离线设计软件(有基因组DNA序列即可设计!)

 

举办地点:

北京理工大学国际教育交流中心(海淀区北三环西路66号)

参加对象

从事医学、生命科学、农学等领域科研工作者和高校教师及研究生。

授课方式

1.理论讲授。

2.每位学员在辅导教师的指导下,独立完成实验操作。(可选)

CRISPR 质 粒 清 单

Plant

#50588

pHSN401

CRISPR/Cas based plant genome editing and gene regulation; expresses 3×FLAG-NLS-zCas9-NLS, gRNA scaffold for insertion of target sequence (AtU6-26 promoter), Hyg resistance

#63142

pRGEB32

(Empty Backbone) Express sgRNA/PTG with rice snoRNA U3 promoter and Cas9 with rice ubiquitin promoter for Agrobacterium-mediated transformation.

#51295

pRGEB31

(Empty Backbone) Binary vector derived from pRGE31. Deliver sgRNA and Cas9 into plant. by agrobacterium mediated transformation.

Insect

#49330

pAc-sgRNA-Cas9

Expresses sgRNA and Cas9-Puro in Drosophila S2 cells

C.elegans

#47549

pDD162

Cas9 + sgRNA plasmid that can be modified to cleave any Cas9 target site in the C. elegans genome.

Yeast

#43804

p415

Human Optimized S. pyogenes Cas9

Bateria

#42875

pCRISPR

A crRNA expression plasmid for targeting a specific sequence

 

#84379

pRH2502

Expression of dcas9 D10A H840A from a TetR-regulated uvtetO promoter

#84380

pRH2521

Expression of sgRNA from a imyc promoter (Pimyc)

#61737

pCRISPomyces-2

Streptomyces expression of codon-optimized Cas9 and custom gRNA

#42876

pCas9

Bacterial expression of Cas9 nuclease, tracrRNA and crRNA guide

Zebrafish

#47929

pCS2-nCas9n

expression of an optimized Cas9 for genome-editing in zebrafish

Mammalian

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

#52970

FokI-dCas9

Expresses Fok1 nuclease domain fused to catalytically inactive Cas9 DNA-binding domain in mammalian cells

#61591

PX601

A single vector AAV-Cas9 system containing Cas9 from Staphylococcus aureus (SaCas9) and its sgRNA.

#42229

PX260

This plasmid separately encodes a human codon-optimized SpCas9, a tracrRNA and customizable crRNA.

#42230

PX330

A human codon-optimized SpCas9 and chimeric guide RNA expression plasmid.

#48138

PX458[GFP]

Cas9 from S. pyogenes with 2A-EGFP, and cloning backbone for sgRNA

#48139

PX459[Puromycin]

Cas9 from S. pyogenes with 2A-Puro, and cloning backbone for sgRNA (V2.0)

#48140

PX461

Cas9n (D10A nickase mutant) from S. pyogenes with 2A-EGFP, and cloning backbone for sgRNA

#48141

PX462[Cas9n,Puromycin]

Cas9n (D10A nickase mutant) from S. pyogenes with 2A-Puro, and cloning backbone for sgRNA

#50661

pCW-Cas9[Tet-on,Puromycin]

Inducible lentiviral expression of SpCas9

#52963

LentiGuide-puro-Vector

Expresses S. pyogenes CRISPR chimeric RNA element with customizable sgRNA from U6 promoter and puromycin resistance from EF-1a promoter. Lentiviral backbone.

#52962

lentiCas9-Blast

Expresses human codon-optimized S. pyogenes Cas9 protein and blasticidin resistance from EFS promoter. 3rd generation lentiviral backbone.

#69982

pY010 (pcDNA3.1-hAsCpf1)

 Expresses humanized AsCpf1

#19319

pLJM1-EGFP

(Empty Backbone) 3rd gen lentiviral vector for EGFP fusion; PGK driven puromycin

#12259

pMD2.G

VSV-G envelope expressing plasmid

#12260

psPAX2 

Lentivirus package plasmids

#61427

lenti sgRNA(MS2)_zeo backbone

(Empty Backbone) 3rd generation lenti sgRNA cloning backbone with MS2 loops at tetraloop and stemloop 2 and EF1a-zeo resistance marker. Contains BsmBI sites for insertion of spacer sequences.

#61426

lenti MS2-P65-HSF1_Hygro

lenti vector encoding the MS2-P65-HSF1 activator helper complex with a 2A Hygro resistance marker (EF1a-MS2-p65-HSF1-2A-Hygro-WPRE)

#61425


lenti dCAS-VP64_Blast

3rd generation lenti vector encoding dCAS9-VP64 with 2A Blast resistance marker (EF1a-NLS-dCas9(N863)-VP64-2A-Blast-WPRE)

#71814

eSpCas9(1.1)

Expresses high specificity SpCas9. Px330-like plasmid.

#47327

pET-28b-Cas9-His

For in vitro expression and purification of Cas9 protein

#62934

pET-NLS-Cas9-6xHis

Expression of NLS-Cas9-6xHis in bacterial cells

86840

pJH373

mamalian expression of AcrIIA2

84750

Lenti-AsCpf1-Blast

Expresses human codon-optimized AsCpf1 protein and blasticidin resistance from EFS promoter. Lentiviral backbone.

84752

Lenti_gRNA-Puro

(Empty Backbone) Expresses Cpf1 customizable sgRNA from U6 promoter and puromycin resistance from EF-1a promoter

79145

pCAG-eCas9-GFP-U6-gRNA

All-in-one CRISPR/Cas9 vector with high-fidelity eSpCas9 expression in human pluripotent stem cells

84745

pY30

Expresses huAsCpf1-P2A-puro and crRNA guide

84743

pY094

Expresses huAsCpf1-T2A-GFP and crRNA guide

84741

pY026

Expresses huAsCpf1 and crRNA guide

60958

PX552

pAAV-U6sgRNA(SapI)_hSyn-GFP-KASH-bGH (SpGuide acceptor). AAV plasmid for sgRNA cloning. GFP-KASH fusion facilitates FACS sorting of cells and nuclei.

79152

pC003 - LshC2C2 locus into pACYC184 for spacer cloning

LshC2c2 locus in pACYC184 with BsaI sites for spacer cloning

79150

pC001 - huLshC2C2-MBP for bacterial expression

Expresses human codon-optimized LshC2c2 for purification in E. coli

64324

pU6-(BbsI)_CBh-Cas9-T2A-mCherry

Expression vector for sgRNAs cloned into the BbsI sites and for expression of Cas9 linked to mCherry via a T2A peptide

64222

pU6-(BbsI)_CBh-Cas9-T2A-mcherry-P2A-Ad4E4orf6

Expression vector for sgRNA and for Expression of Cas9 linked via T2A to mCherry linked to the Ad4 E4orf6 gene via P2A

64218

pU6-(BbsI)_CBh-Cas9-T2A-BFP-P2A-Ad4E1B

Expression vector for sgRNA and for Expression of Cas9 linked to BFP via T2A linked to Ad4 E1B via P2A

64323

pU6-(BbsI)_CBh-Cas9-T2A-BFP

Expression vector for sgRNAs cloned into the BbsI sites and for expression of Cas9 linked to BFP via a T2A peptide

51023

pSLQ1658-dCas9-EGFP

Template for NLS-dCas9-NLS-EGFP fusion protein for CRISPR imaging (the recipient vector can be TetON 3G promoter system)

64108

pHAGE-TO-dCas9-3XmCherry

Expression of Sp dCas9-3XmCherry in mammalian cells

 

60957

PX551

pAAV-pMecp2-SpCas9-spA (AAV-SpCas9). AAV plasmid expressing Cas9 in neurons under control of truncated mecp2 promoter.

 

100806

BE4-Gam

Expresses BE4-Gam in mammalian cells

 

100809

SaBE4-Gam

Expresses SaBE4-Gam in mammalian cells

 

102917

pCMV-ABE7.8

expresses ABE7.8 in mammalian cells

 

102919

pCMV-ABE7.10

expresses ABE7.10 in mammalian cells

 

108382

xCas9(3.7)-ABE(7.10)

Mammalian expression vector for xCas9(3.7)-ABE

-主办方介绍-

北京微旋基因技术有限公司 北京微旋基因技术有限公司

公司主营业务为通过基因检测、质谱检测、生物信息分析等手段,为医疗机构、科研机构、企事业单位等提供基因组学类的检测和研究服务。微旋基因秉承“基因科技造福人类”的愿景,以推动生命科学研究进展、生命大数据应用和提高全球医疗健康水平为出发点,基于基因领域研究成果及精准检测技术在民生健康方面的应用,致力于加速科技创新,减少出生缺陷,加强肿瘤防控,抑制重大疾病对人类的危害,实现精准治愈感染,全面助力精准医学。 公司主要服务于国内外的科研院校、研究所、独立医学检验实验室、制药公司等机构, 以及国内外的各级医院、体检机构等医疗卫生机构、公司客户和大众客户。目前,公司业务已经覆盖了上百家医疗机构,其中三甲医院30多家一直与我们保持着量好的业务和科研合作,与各个地区合作的海内外医疗和科研机构超过100家。 公司致力于基因技术的临床应用,细胞治疗和药物研发,汇聚了来自国内外医学、分子生物学、基因组学、生物信息学、计算机科学等各个领域的专业技术人才。

课程安排:

日期

时间

培训内容

12月20日

10:00-18:00

培训报到

12月21日

9:00-11:30

理论讲解:

一、基因编辑技术简介(三代基因编辑工具)

1. ZFN 2.TALEN 3.CRISPR

二、CRISPR/Cas9基因编辑技术原理

1. CRISPR/Cas9发现历史

2. CRISPR/Cas9作用机制解析

3. CRISPR/Cas9系统改造策略

13:00-17:00

理论讲解

一、sgRNA在线设计构建实战演练(1.靶基因序列查找2.sgRNA在线设计合成)

二、CRISPR/Cas9转染策略:

1.生物转染(慢病毒、腺相关病毒等)

2.物理转染 (电转核酸/RNP、显微注射、基因枪)

3.化学转染 (脂质体、阳离子聚合物)

三、CRISPR/Cas9 sgRNA效率检测,脱靶检测及解决策略

1、高保真Cas9(espCas9、Hifi-Cas9、Cluster1-Cas9)

12月22日

9:00-11:30

理论讲解:

一、CRISPR技术应用解析

1.基因敲除(单基因敲除、多基因敲除、大片段删除、多靶点sgRNA载体构建策略)

2.基因敲入实战演练(gRNA选择、同源臂设计、导入,长片段导入策略/提高基因敲入效率策略,PITCh、HITI、CRISPR-转座酶高效基因敲入系统)

3.CRISPR在转录调控中的应用(转录激活、转录抑制系统)

4.CRISPR靶基因标记定位

二、CRISPR案例解析

1.基因敲除在小鼠模型构建、植物、细胞、细菌、真菌等中的应用案例解析

2.基于CRISPR的全基因组基因敲除高通量筛选策略(文库构建,选择,流程优化等)

3.基于CRISPR的全基因组转录激活/抑制高通量筛选策略(文库构建,选择,流程优化等)

三、CRISPR/Cas9与基因沉默技术(siRNA、shRNA)系统比较。

13:00-17:00

理论讲解:

一、单碱基基因编辑技术简介及在基因治疗中的应用

1.HF2-BE2 2.BE3系统 3.ABE系统4.单碱基基因编辑脱靶克服。

二、基因CRISPR的基因检测系统

1、CRISPR-Cas12a系统介绍(DETECTR)

2、CRISPR-Cas13a系统介绍(SHERLOCK-多重病原菌检测)

三、CRISPR/Cas9系统在肿瘤和遗传病治疗中应用解析

1、CRISPR结合免疫检查点抑制剂治疗肿瘤

2、单基因遗传病治疗(DMD、先天性黑朦、地中海贫血等)

3、CRISPR治疗HIV-基因编辑婴儿解析

4、CRISPR治疗HIV炎性白血病病例解析

四、新一代无模板基因敲入系统解析

1.  1、CRISPR Primer-editing 基因敲入原理及应用

 

日期

时间

培训内容

12月22日

18:00

实验操作:CRISPR/Cas9敲除质粒转染靶细胞

12月23日

9:00-11:30

实验操作:一、CRISPR/Cas9基因表达载体克隆构建1.sgRNA设计合成

2.敲除载体选择及线性化

3.sgRNA连接,转化等

 

13:00-17:00

实验操作:

1.CRISPR/Cas9转染后靶DNA检测

2.靶基因修饰位点扩增及鉴定

3. CRISPR基因敲除效果检测

 

刘刚博士

2008年博士毕业于中国科学院上海生命科学研究院,从事肿瘤干细胞,细胞衰老,肿瘤转移等细胞作用网络和通路的研究,并作为骨干研究人员参加了973计划项目、国家自然科学基金重点项目、在香港中文大学做为作为Postdoc和Research fellow,从事研究工作。先后Nature Genetics,cell research、PLOS one等期刊发表论文十余篇。

-会议门票-

收费标准

注册费:3200元/人,2019年12月13号之前汇款报名可以优惠至:3000元/人。实验操作课程需加500元/人。同一个单位三个人以上报名可以免费构建价值1500元的质粒一个;包括学费、资料费、试剂耗材费、其他材料费;免费提供工作午餐,可协助安排住宿,住宿费用自理。

推荐酒店地点:

北京理工大学国际教育交流中心360元/标间。

-场馆介绍-

北京理工大学国际教育交流中心
会议标签:

CRISPR Cas9 基因靶向 基因

温馨提示
酒店与住宿: 异地参会客户请注意,为防止会议临时变动,建议您先与活动家客服确认参会信息,再安排出行与住宿事宜。
退款规则: 活动各项资源需提前采购,购票后不支持退款,可以换人参加。

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