第41期 CRISPR/Cas9基因编辑技术专题培训班

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培训内容

11月6日

9:00-11:30

理论讲解：

一、基因编辑技术简介（三代基因编辑工具）

1. ZFN 2.TALEN 3.CRISPR

二、CRISPR/Cas9基因编辑技术原理

1. CRISPR/Cas9发现历史

2. CRISPR/Cas9作用机制解析

3. CRISPR/Cas9系统改造策略

13:00-17:00

理论讲解：

一、sgRNA在线设计构建实战演练(1.靶基因序列查找2.sgRNA在线设计合成)

二、CRISPR/Cas9转染策略:

1.生物转染（慢病毒、腺相关病毒等）

2.物理转染 （电转核酸/RNP、显微注射、基因枪）

3.化学转染 （脂质体、阳离子聚合物）

三、CRISPR/Cas9 sgRNA效率检测，脱靶检测及解决策略

1、高保真Cas9（espCas9、Hifi-Cas9、Cluster1-Cas9）

11月7

9:00-11:30

理论讲解：

一、CRISPR技术应用解析

1.基因敲除（单基因敲除、多基因敲除、大片段删除、多靶点sgRNA载体构建策略）

2.基因敲入实战演练（gRNA选择、同源臂设计、导入，长片段导入策略/提高基因敲入效率策略，PITCh、HITI、CRISPR-转座酶高效基因敲入系统）

3.CRISPR在转录调控中的应用（转录激活、转录抑制系统）

4.CRISPR靶基因标记定位

二、CRISPR案例解析

1.基因敲除在小鼠模型构建、植物、细胞、细菌、真菌等中的应用案例解析

2.基于CRISPR的全基因组基因敲除高通量筛选策略（文库构建，选择，流程优化等）

3.基于CRISPR的全基因组转录激活/抑制高通量筛选策略（文库构建，选择，流程优化等）

三、CRISPR/Cas9与基因沉默技术（siRNA、shRNA）系统比较。

13:00-17:00

理论讲解：

一、单碱基基因编辑技术简介及在基因治疗中的应用

1.HF2-BE2 2.BE3系统 3.ABE系统4.单碱基基因编辑脱靶克服。

二、基因CRISPR的基因检测系统

1、CRISPR-Cas12a系统介绍(DETECTR)

2、CRISPR-Cas13a系统介绍(SHERLOCK-多重病原菌检测)

三、CRISPR/Cas9系统在肿瘤和遗传病治疗中应用解析

1、CRISPR结合免疫检查点抑制剂治疗肿瘤

2、单基因遗传病治疗（DMD、先天性黑朦、地中海贫血等）

3、CRISPR治疗HIV-基因编辑婴儿解析

4、CRISPR治疗HIV炎性白血病病例解析

四、新一代无模板基因敲入系统解析

1、CRISPR Primer-editing 基因敲入原理及应用